AAT Bioquest  15281  Amplite® 熒光 NADP 檢測試劑盒 *藍色熒光*

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AAT Bioquest 熒光 NADP 檢測試劑盒-常備現貨

美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學研究、診斷研發及藥物開發的科學家研發、生產和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域，包括吸收（顏色），熒光和發光技術。AAT Bioquest的產品幫助 quan 世 jie 的科學家和生物醫藥研究者更好的了解生物化學，免疫學，細胞生物學和分子生物學等領域。AAT Bioquest會不斷介紹新產品，快速的豐富各個領域的產品。

AAT Bioquest  15281  Amplite® 熒光 NADP 檢測試劑盒 *藍色熒光*  200 Tests，產品簡介：

產品品牌：AAT Bioquest

產品貨號：15281

產品名稱：Amplite® 熒光 NADP 檢測試劑盒 *藍色熒光*

產品規格：200 Tests

AAT Bioquest 熒光 NADP 檢測試劑盒-常備現貨 

AAT Bioquest  15281  Amplite® 熒光 NADP 檢測試劑盒 *藍色熒光*  200 Tests，產品說明：

煙xian胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）和煙xian胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+）是活細胞中發現的許多酶反應的兩個重要輔助因子。NAD通過酯鍵將磷酸基團添加到腺苷核苷酸的2'位置，形成NADP。NADP用于合成代謝生物反應，如脂肪酸和核酸合成，需要NADPH作為還原劑。在葉綠體中，NADP是一種氧化劑，在光合作用的初步反應中很重要。光合作用產生的NADPH被用作光合作用加爾文循環中生物合成反應的還原能力。量化這些因素的產生或消耗是監測酶介導反應或篩選這些酶反應的調節劑或底物的重要方法。市場上有幾種試劑盒可以量化NADPH或NADP / NADPH總量，但是迄今為止，在存在大量過量NADPH的情況下檢測NADP生成一直非常具有挑戰性，因為NADP的吸收峰在260nm處并且不發出熒光，這使得測量不切實際。Amplite®熒光NADP檢測試劑盒可靈敏快速地檢測NADP。該試劑盒使用我們新開發的NADP傳感器Quest Fluor™ NADP試劑直接測量NADP。該試劑盒中使用的專有探針僅與NADP反應，以產生在特定激發和發射光譜范圍內發出熒光的產物，并且對NADPH幾乎沒有反應。該試劑盒可在 30 μL 測定體積中檢測低至 100 nM NADP，并在存在過量 NADPH 的情況下監測 0.3% NADP 生成。該測定可以以方便的 96 孔或 384 孔微量滴定板形式進行，可用于高通量篩選。

平臺

熒光酶標儀

Excitation：420 納米

Emission：480 納米

Cutoff：455 納米

推薦板：純黑色

組件

組件A：Quest Fluor™ NADP Probe  1 瓶 （5 mL）

組分B：檢測溶液       1 瓶 （5 mL）

組分C：增強劑溶液    1 瓶 （3.5 毫升）

組件D：NADP標準    1 瓶 （389 μg）

1.     制備 NADP 標準品或測試樣品 （50 μL）

2.     添加 20 μL Quest 福陸™ NADP 探針

3.     加入 20 μL 檢測液

4.     在室溫下孵育 10 - 20 分鐘

5.     添加 15 μL 增強劑溶液

6.     在室溫下孵育 10 - 20 分鐘

7.     監測 420/480 nm 處的熒光（截止值 = 455 nm）

重要說明：在開始實驗之前，在室溫下解凍每個試劑盒組件。

儲備液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復凍融循環。

1. NADP 標準溶液 （1 mM）：

加入 500 μL ddH2O放入NADP標準品（組分D）的小瓶中，制成1mM NADP標準溶液。

標準溶液的制備

NADP 標準

將 10 μL 1mM NADP 標準溶液加入 990 μL H 中2O 或 1X PBS 緩沖液以生成 10 μM NADP 標準溶液 （NS7）。取 10 μM NADP 標準溶液 （NS7），在 H 中進行 1：3 連續稀釋2O 或 1X PBS 緩沖液以獲得連續稀釋的 NADP 標準品 （NS6 - NS1）。注意：稀釋的NADP標準溶液不穩定，應在4小時內使用。

實驗方案樣本

表 1.NADP標準品和測試樣品在黑色/實心底部96孔微孔板中的布局。NS=NADP標準品（NS1-NS7，0.01至10μM）;BL = 空白控件;TS=測試樣品。

1.     根據表1和表2中提供的布局制備NADP標準品（NS），空白對照（BL）和測試樣品（TS）。對于 384 孔板，每孔使用 25 μL 試劑而不是 50 μL。

2.     將 20 μL Quest Fluor™ NADP Probe（組分 A）溶液加入 NADP 標準品、空白對照和測試樣品的每個孔中，充分混合。對于 384 孔板，改用 10 μL Quest Fluor™ Probe（組分 A）溶液。

3.     向每個孔中加入 20 μL 測定溶液（組分 B），充分混合。對于 384 孔板，改用 10 μL 檢測溶液（組分 B）。

4.     將反應在室溫下孵育10-20分鐘，避光。

5.     向每個孔中加入 15 μL 增強劑（組分 C），使 NADP 測定總體積為 105 μL/孔。對于 384 孔板，改為添加 7.5 uL 增強劑（組分 C），總體積為 52.5 μL/孔。

6.     在室溫下孵育 10 - 20 分鐘，避光。

7.     用熒光酶標儀在420/480nm處監測熒光增加（截止= 455nm）。

產品訂購信息：

15281  Amplite® 熒光 NADP 檢測試劑盒 *藍色熒光*  200 Tests